一、检查气体过滤器、载气、进样垫和衬管等
检查进样垫和气体过滤器,保证辅助气和检测器用气通畅有效。如果以前做过沸点较高的化合物,需要将进样口衬管清洗或更换。
二、将螺母和密封垫圈装在柱上,并将色谱柱两端口小心切平
在色谱柱的一端装上相应的螺母和密封垫圈,此时色谱柱端口无前后之分,色谱柱支架的支撑部分应总是朝向着柱箱门。安装好螺母和密封垫圈后,用陶瓷刀片将色谱柱端口切平,并用放大镜进行检查,以确认切口和管壁成直角,并且没有残留的碎屑、没有毛边或不平的切割面。
三、将色谱柱连于进样口上
通常来说,色谱柱的顶端应保持在进样口衬管的中下部,当进样针穿过隔垫插人进样口后,如果针尖与衬管中的色谱柱顶端相差1-2cm,这就是较为理想的状态。从色谱柱架上取出需要连接的足够的长度,并按步骤2切割柱子,连接到进样口。避免用力弯曲压挤色谱柱,并小心不要让标记牌等有锋利边缘的物品与色谱柱接触磨擦,以防柱身断裂或受损。将色谱柱正确地嵌人进样口后,把连接螺母拧上,用手拧紧后用扳手再拧1/4一1/2圈。
将色谱柱悬挂在色谱仪器炉箱内,注意不要刮伤色谱柱外表面涂层,色谱柱不能与炉箱表面接触。
四、接通载气
载气须为高纯氮气(或氦气),纯度达99.999%,使用极性柱时(如FFAP、PEG-20M等),载气加脱氧管进一步脱氧,这样可延长柱子的使用寿命。
当色谱柱与进样口连接好后,接通载气。调节柱前压力以得到合适的载气流速。将色谱柱的另一端(空端),插人装有乙醇的样品瓶中,正常情况下,我们可以看见瓶中稳定持续的气泡。如果没有气泡,就要重新检查一下载气装置和
流量控制器等是否全部安装或设置正确,并检测一下整个气路有无泄漏。等所有问题解决后,将色谱柱端口从瓶中取出,擦试干净,保证柱端口无溶剂残留,再进行下一步安装。
毛细管柱前压参考设置(Mpa)
柱长(m) | 柱内径(mm) | 0.25 | 0.32 | 0.53 |
15 | 柱前压(Mpa) | 0.05 | 0.04 | 0.02 |
30 | 0.1 | 0.08 | 0.03 | |
50 | 0.18 | 0.14 | 0.05 |
五、将色谱柱连于检测器上
其安装和所需注意的事项与以上色谱柱与进样口连接(步骤三)部分所讲述的大致相同。安装时要注意色谱柱末端要高于尾吹点,或按照色谱仪说明书安装。
六、进行气体检漏
在色谱柱加热前,要对GC系统进行检漏。建议使用1:1的异丙醇:水的混合溶液进行检查。
七、色谱柱的老化
色谱柱安装和系统检漏工作完成后,就可以对色谱柱进行老化了。将色谱柱程序升温至最高使用温度的30℃以下,恒温30分钟。这样柱子内吸附的组份会被吹出,以免影响您的分析。
最后,将色谱柱的温度降低至所需要的温度,即可进行实际样品的分析。
八、色谱柱的正确使用
毛细管色谱柱的寿命与所使用的载气纯度、水蒸气含量以及分析样品的性质有关,操作不当将导致色谱柱寿命降低,延长其寿命的办法是合理科学的使用。
1、为延长色谱柱使用寿命,在不分析样品时,将色谱柱柱温降低至100℃以下。
2、每一根色谱柱都具有上限和下限使用温度。通常,最低使用温度是固定相的相变温度,当操作温度低于下限温度时,色谱峰形变坏、分离度下降,但不会损坏色谱柱。上限温度通常有两个,较低的是恒温上限温度,较高的是程序升温上限温度。色谱柱保持在上限温度的时间应小于10min
九、色谱柱的保存
在不使用时,用配置的堵头或进样隔垫密封色谱柱两端,避免水分和化学挥发物的污染,并存放在原包装盒内。再次使用时,用陶瓷刀片切除色谱柱两端,以防止堵头碎片堵塞色谱柱。